許多人在做液相對照品濃度換算的時候,查看相關書籍的時候會容易搞混淆一些知識,不知道是按照文獻中的波長還是自己掃描的波長來檢測,這個時候小編就要提醒大家了,不可完全的相信書籍上的內容,因為有些地方在很多年過后人們在實踐中已經完全否定了一些理論。
我們在用高效液相測定時,首先肯定樣品成分,使用到這個成分的純品(對照品),將對照品溶液配制成與樣品成分濃度相當的濃度(比方樣品濃度是10mg/ml左右,對照品溶液就配制成10mg/ml)。對照品溶液和供試品溶液分別進樣,停止色譜剖析,取得對照品成分峰面積與供試品溶液峰面積。此時已知對照溶液峰面積,對照溶液濃度,供試品溶液峰面積,求供試品溶液濃度,由于成分在液相中響應值不變,故對照品溶液濃度/對照品溶液峰面積=F(即響應因子)=供試品溶液濃度/供試品溶液峰面積,求得供試品溶液濃度。
假如想算含量,那么公式為:含量=[(濃度X稀釋倍數)/供試品稱樣量]X**。
用不同濃度對照品所做的規范曲線(工作曲線,以對照品濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標),將供試品測的峰面積代入規范曲線計算其含量,這是外標法。
C對照品/C供試品=A對照品/A供試品)計算出來的是外標一點法。
小編認為在樣品和對照品濃度很接近的時候,那么兩者之間,結果差別就不會太大。當然,也不排除差距很大的時候,因為外標一點實踐上是原點和單個對照一點的連線做規范曲線,沒有截距、斜率也不一定準,就有可能導致誤差變大。
當然,甚至有些人會問到,我沒有對照品能用液相測含量嗎?小編確定以及肯定的回答你,是不能的,因為高效液相測定濃度含量到現在為止,***具有權威性的方法還是得依靠外標法來測定,使得結果更為準確,減小誤差;至于其他方法測出來的純度值是不能夠準確的。
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